Escherichia Coli의 성장에 대한 문화 조건의 영향

E. coli를 사용하여 의약품을 생산하는 것은 생물학적 방법입니다. 즉, 생물 공학 기술을 사용하여 외래 유전자를 E. 대장균, 발효 및 배양, 박테리아를 수집하기 위해 원심 분리 한 다음 특정 용액을 사용하여 박테리아를 분해하고 수집합니다. 표적 단백질은 몇 가지 후속 처리 후에 약으로 만들어집니다.

1. 문화 온도

실험에 따르면 최적의 배양 온도는 35 ~ 40 ℃ 범위이며, 온도 증가에 따라 세포 밀도가 증가하여 E의 일반적인 성장 특성과 일치합니다. 대장균. 그러나 성장률은 37 ℃ ~ 38 ℃에서 더 빠르며, 그 이후의 성장은 비교적 평평하다. 대장균의 일반적인 배양 특성 및 온도 및 다른 영향 인자의 교차-영향을 조합하여, 배양 온도를 실험에서 37.5 ℃로 설정하였다.

2. pH 값

E. 배양 후 다른 pH 값을 가진 18 시간 동안 콜리는 8.0 pH 값이 세포 밀도에 큰 영향을 미치지 않음을 보여줍니다. pH 값이 너무 낮거나 너무 높아서 좋은 결과를 얻을 수 없습니다. PH 값이 7.5 경우, 세포 밀도는 비교적 높고, OD600nm 는 3.25 에 도달한다.

3. 박테리아의 성장에 용존 산소의 영향

발효기 내의 상이한 용존 산소 지수에 따르면, 18 시간 동안 배양될 때의 발효 시스템의 세포 밀도를 얻었다. 실험 결과는 용해된 산소 지수의 증가에 따라 세포 밀도가 연속적으로 증가하지만, 50% 후 세포 밀도는 서서히 증가한다는 것을 보여준다.

4. 접종량의 영향

상이한 접종량을 최적화하면 박테리아의 성장에 더 큰 영향을 미칠 수 있다. 3% 4%, 박테리아의 성장 상태는 너무 낮거나 높은 접종량보다 낫습니다. 접종량이 너무 낮 으면 박테리아의 성장이 너무 느려집니다. 너무 높은 접종량은 초기 단계에서 많은 양의 영양소를 소비하고 종자 균주의 낭비를 유발하므로 실험에서 4% 접종량을 사용했습니다.

5. 문화 시간의 결정

다른 인큐베이션 시간의 실험 결과는 박테리아가 12 시간에서 18 시간까지 배수로 증가한 후 천천히 자라는 것을 보여주었습니다. 기하 급수적 성장의 후기 단계에서 박테리아의 에너지는 대량 번식에 적합하지 않지만 대사 산물에 의해 영향을 받는다는 것을 보여줍니다. 따라서 성장 사이클을 단축하기 위해 박테리아의 수확은 기하 급수적 성장 기간, 즉 18h 에 있어야합니다.

6. 속도의 결정

흔들림 인큐베이터의 속도는 용존 산소의 증가에 따라 증가하고 이에 따라 세포 밀도가 증가한다. 세포 밀도의 성장 속도는 100 ~ 200r/min에서 더 빠르며 200 ~ 300r/min에서 상대적으로 느립니다. 200r/min의 속도가 이미 공기 중 산소의 용해를 촉진 할 수 있음을 나타냅니다. 속도의 증가는 거품과 같은 부작용을 일으킬 수 있으므로 테스트에서 채택 된 최상의 속도는 200r/min입니다.

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